Chemical bioassay data
Western Blot
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AccessionKCA10010464
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Submission date2026-03-19
Project Detail
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Accession
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KAP242329 |
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Project title
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Chemical Binding Assay to proteins for AMG-510 (Reference) and its variants
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Project title in Korean
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AMG-510와 그 변형 화합물의 단백질 바인딩 실험
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Project description
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This project was carried out to assess the inhibition of AMG-510 and selected AMG-510 variants to the key pathogenic pathway of Non-Small Cell Lung Cancer related to KRAS G12C and its downstream in MIA PaCa-2 cell line with Western Blot methods. AMG-510 results demonstrate that it inhibits KRAS and its downstream pERK at IC50 of 9.82nM but our candidates exhibit suppressed inhibitory functions in both KRAS and pERK.
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Project description in Korean
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이 연구는 AMG-510과 선택된 AMG-510 변형 물질에 대해 KRAS G12C 변이와 그 다운스트림과 관련됨 비소세포성 폐암의 키 패스웨이를 저해하는지를 확인하기 위해 웨스턴 블라트 방법을 사용하여 MIA PaCa-2 셀라인에서 진행하였음. 실험 결과 AMG-510의 경우 KRAS와 그 다운스트림인 pERK에 대해 9.82nM의 IC50를 가지고 저해제로서 기능하는 것으로 확인되었으나 선택된 두 물질에 대해서는 KRAS와 그 다운스트림에 대해 기능하지 않는 것으로 확인되었음.
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메타데이터 정보
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Assay Name
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Western Blot
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Target Name
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Classification of Target mechanism
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KRAS G12C inhibition
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Targeting Disease
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Assay Type
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Cell-based assays
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Assay System
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in vitro
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Assay material
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MIA PACA-2 CELL LINE
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Experimental Method
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세포를 12-well plate에 파종하여 37 °C, 5% CO₂에서 overnight 배양한 후 화합물을 처리하고 3시간 반응시켰다. 배지를 제거하고 PBS로 세척 후 −80 °C에 보관하였다. Lysis buffer로 세포를 용해하고 원심분리하여 상등액을 회수하였다. BCA 방법으로 단백질을 정량 후 동일 농도로 맞추고 loading buffer 처리 후 SDS-PAGE를 수행하였다. 단백질을 membrane으로 전이한 뒤 blocking, 1차 및 2차 항체 반응과 TBS-T 세척을 거쳐 ECL로 신호를 검출하였다.
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Statistics
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Screening Type
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Target-based
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Experiment Date
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2025-01-14
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Release Date
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2026-03-18
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Chemical ID
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Chemical Name
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Sotorasib
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Input Type
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multiple concentrations
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Activity outcome
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Active
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Term
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% of Inhibiton
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Relation
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=
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Activity value
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95.95619692115345
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Unit
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%
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Conc
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1000
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Conc_unit
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nM
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